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如何在奧林巴斯顯微鏡(CX31)下區(qū)分活細菌和死細菌

更新時間:2015-06-30      瀏覽次數(shù):4797

    可以采用染色法。碘化丙啶是紅色熒光活力染料,結(jié)合DNA。碘化丙啶不能穿透活細胞和早期凋亡細胞的細胞膜,當細胞失去膜的完整性,碘化丙啶可染色DNA,也就是說它可以染死細胞,這個是常用的方法。
    Trypan Blue是一種常被使用于細胞染色的染劑。Trypan Blue無法穿透活細胞的細胞膜,但是當細胞受傷或死亡,細胞膜破損時,Trypan Blue則可以通透細胞膜進入細胞內(nèi),使細胞染成藍黑色。利用此一特點,配合血球計數(shù)器的使用,則可以在奧林巴斯顯微鏡(CX22/CX31/CX41)底下,分辨出細胞樣本中的活細胞與死細胞,以方便細胞計數(shù)。
    一般用美藍與堿性品紅的復(fù)合染料進行死菌的區(qū)分。染色后,活菌染為藍色,死菌和培養(yǎng)基偏紅,在顯微鏡(CX22/CX31/CX41)下很好區(qū)分。堿性品紅用乙醇加熱溶解,過濾,按1:10左右加入,可以根據(jù)情況適當調(diào)整到可以區(qū)分活菌和培養(yǎng)基即可。這是發(fā)酵中檢查是否染菌的zui常用方法。
    蘸取含細菌的液體LB培養(yǎng)基,在奧林巴斯顯微鏡下直接觀察,活菌游動,而死菌不動,這是zui簡單的一種粗略的方法,用戶可以試試。

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